FASTPLEX ™ Norovírus multiplex Kit de detecção de PCR digital de uma etapa de uma etapa

Os norovírus pertencem à família Caliciviridae. Eles são um grupo de vírus de RNA de senso positivo e de fita simples, que causam principalmente gastroenterite aguda ou inflamação gastrointestinal. O norovírus é caracterizado por mutação rápida, forte resistência ambiental e baixa dose infecciosa. É extremamente adaptável ao meio ambiente e pode sobreviver em uma variedade de ambientes, fornecendo condições favoráveis para sua propagação. O vírus é transmitido principalmente através da rota fecal-oral, transmissão de aerossol e contato. Os sintomas da infecção por norovírus geralmente aparecem dentro de 12 a 48 horas após a exposição e incluem náusea, vômito, dor abdominal, febre, dor de cabeça e diarréia.

Uso pretendido

Este kit foi projetado para a detecção dos ácidos nucleicos de norovírus e norovírus GII. Os resultados podem ser usados como ajuda no diagnóstico de pacientes com infecção por norovírus ou suspeita de infecção e também podem ser usados para detectar ácidos nucleicos de norovírus no ambiente e nos alimentos.

Os resultados deste kit são apenas para referência de diagnóstico e não devem ser usados como critério exclusivo para o diagnóstico. Recomenda -se analisar a condição em conjunto com as manifestações clínicas do paciente e outros resultados dos testes de laboratório.

Recursos do produto

Os métodos de detecção para norovírus incluem microscopia eletrônica, métodos imunológicos e métodos moleculares. Os métodos moleculares incluem RT-qPCR, RT-LAMP, GENE CHIP e assim por diante. Entre eles, a RT-qPCR   é conhecida como padrão-ouro para detectar o norovírus, mas tem desvantagens, como a necessidade de usar uma curva padrão para quantificação e a reação sendo afetada pelos inibidores. A PCR digital resolveu efetivamente esse problema. O processo de detecção não requer uma curva padrão e pode executar uma análise quantitativa absoluta da carga do vírus sem depender do valor da TC. Além disso, o sistema exclusivo de reação de nanolitros de PCR digital pode reduzir o impacto dos inibidores de PCR e é compatível com maiores volumes de carga de amostra. O ensaio multi-plex também melhora a eficiência da detecção.

As vantagens do método de PCR digital no norovírus de detecção são as seguintes:

Alta precisão: o kit FastPlex ™ pode fornecer quantificação absoluta do ácido nucleico alvo sem a necessidade de uma curva padrão. Ele pode determinar com precisão o número de cópias do norovírus, o que é especialmente útil para a detecção de amostras de baixa abundância.

Alta resistência aos inibidores: o sistema de reação nanoliter exclusivo da PCR digital pode reduzir o impacto dos inibidores da PCR. Isso é importante para a detecção de amostras com matrizes complexas, como amostras ambientais e alimentares, onde os inibidores podem estar presentes.

Alta sensibilidade : O kit FastPlex ™ pode detectar um pequeno número de moléculas alvo em um grande fundo de moléculas não -alvo. Isso torna possível detectar norovírus em amostras com baixas cargas virais.

Alta reprodutibilidade : Os resultados do teste são menos afetados por condições e operadores experimentais e têm boa reprodutibilidade. Isso é importante para a consistência e confiabilidade dos resultados da detecção.

Detecção de múltiplos genótipos em uma única amostra: o kit Fastplex ™ pode detectar simultaneamente o norovírus GI e/ou o norovírus GII. A sonda de detecção para o norovírus GI é rotulada com fluorescência hexadecimal, a sonda de detecção para o norovírus GII é rotulada com fluorescência FAM.

Ø ONE   PASSO DE ONE PASSO DE TRANSCRIÇÃO REVERSA.

Ø   Pode detectar vários alvos, como fezes, esgoto, alimentos, pacientes e suspeitos de pacientes.

Ø   Um único poço pode diferenciar simultaneamente diferentes genótipos (norovírus gi, norovírus GII, controle de fago MS2 e controle interno humano).

Ø   A quantificação absoluta do vírus pode ser tão baixa quanto uma única cópia.

O kit de detecção de norovírus de uma etapa de Rainsure tem um controle rigoroso de qualidade

(Channel Rox para monitorar a eficiência da extração)

	Fam （Gⅱ）	Hexadecimal （Gⅰ）	Rox （MS2）	Cy5 （ Humna Reference Internal Reference )
Contrro positivo	-	-	-	-
Controle negativo	+	+	+	+

A análise dos resultados dos testes é simples.

Não.	Fam （ Gⅱ）	Hexadecimal （Gⅰ）	Rox （Controle de extração)	Cy5 （Referência interna humana)	Resultados
1	-	-	+	-	Negativo
2	+	-	+/-	+/-	GII positivo
3	-	+	+/-	+/-	Gi positiv
4	+	+	+/-	+/-	Gi & Giipositive

O excelente desempenho de linearidade do Fastplex ™ Norovírus multiplex de uma etapa de detecção de PCR digital de uma etapa

Coparação do método DPCR e qPCR

	Resultado do DPCR		Resultado do QPCR			Resultado do DPCR		Resultado do QPCR
Samplename	Hexadecimal （gi） cps/ul	FAM （GII） CPS/UL	Fenótipo	Valor de CT	Samplename	Hexadecimal （gi） cps/ul	FAM （GII）  CPS/UL	Fenótipo	Valor de CT
NOV_1	0	6.14	Gⅱ	28.84	NOV_32	1.86	0	Gⅰ	21
NOV_2	0	3.48	Gⅱ	22.58	NOV_33	17397	0	Gⅰ	18.7
Nov_3	0	0.34	Gⅱ	25.19	NOV_34	861	0	Gⅰ	23.3
NOV_4	18145	0	Gⅰ	30.86	NOV_35	224	0	Gⅰ	25
Nov_5	28.7	24.6	Gⅰ/gⅱ	24.33 ； 22,83	NOV_36	14.3	0	Gⅰ	22
NOV_6	247	0	Gⅰ	21.25	NOV_37	12.8	0	Gⅰ	24
NOV_16	0	253	Gⅱ	16.07	NOV_38	21.3	0	Gⅰ	25
NOV_18	0	0.207	Gⅱ	16.73	Nov_39	0	439	Gⅱ	22.64
NOV_20	0	2.26	Gⅱ	30.19	NOV_40	0	179	Gⅱ	23.91
NOV_21	0	4.54	Gⅱ	17.43	NOV_42	0	582	Gⅱ	22.24
NOV_22	0	6.62	Gⅱ	30.13	NOV_43	0	35.4	Gⅱ	24
NOV_23	1000000	859	Gⅰ/gⅱ	19.55 ； 23,54	NOV_44	0	1467	Gⅱ	25
NOV_24	0	1000000	Gⅱ	19.89	NOV_45	0	1.92	Gⅱ	22.6
NOV_25	0	127	Gⅱ	22.42	NOV_46	0	34.8	Gⅱ	24.5
NOV_26	0	66.4	Gⅱ	22.99	NOV_47	0	541	Gⅱ	21.6
NOV_27	0	0.872	Gⅱ	26.37	NOV_48	0	179	Gⅱ	24
NOV_28	81.3	243	Gⅰ/gⅱ	26.34 ； 23,82	Nov_49	0	443	Gⅱ	22
Nov_30	0.288	2.3	Gⅰ/gⅱ	25.92 ； 24.22	NOV_50	0	8599	Gⅱ	20
NOV_31	146	0	Gⅰ	24.7