PCR Em Tempo Real

A reação em cadeia da polimerase em tempo real, às vezes conhecida como qPCR, é uma técnica do laboratório de biologia molecular baseada em cadeia da polimerase (PCR). Em vez de detectar a amplificação no final do PCR, como na PCR tradicional, ele monitora a amplificação de uma molécula de DNA direcionada enquanto está acontecendo (ou seja, em tempo real). A PCR em tempo real pode ser empregada semi-quantitativa (ou seja, acima/abaixo de uma quantidade específica de moléculas de DNA) (PCR semi-quantitativa em tempo real) e quantitativamente (PCR quantitativa em tempo real).
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PCR em tempo real e doenças infecciosas

Os distúrbios infecciosos podem transmitir de uma pessoa para outra direta ou indiretamente porque são provocados por microorganismos patogênicos, como bactérias, vírus, parasitas ou fungos. Infelizmente, mesmo em laboratórios clínicos, o diagnóstico de distúrbios infecciosos está diretamente relacionado ao tempo necessário para identificar o patógeno usando métodos de cultura tradicionais, que podem levar de horas a dias. Os benefícios da PCR em tempo real evoluíram nos últimos dez anos para se tornarem o padrão da indústria para diagnosticar doenças infecciosas. Especialistas em doenças infecciosas defenderam a PCR em tempo real devido à sua excepcional sensibilidade, especificidade, reprodutibilidade, ampla faixa dinâmica e velocidade de amplificação para identificar organismos que não podem ser cultivados in vitro ou em situações em que as técnicas de cultura existentes são insensíveis e/ou requerem tempos de cultura prolongados.

COVID 19

A doença do Coronavírus 2019, nomeada oficialmente CoVID-19 pela Organização Mundial da Saúde (OMS) é uma síndrome respiratória aguda grave (SARS) causada pelo novo coronavirus 2 graves da síndrome respiratória aguda (SARS-COV-2). Os coronavírus são envolvidos vírus de RNA de senso positivo, de senso único, com pelo menos seis quadros de leitura abertos. O genoma do coronavírus codifica as glicoproteínas estruturais picos (s), membrana (M), envelope (e) e nucleocapsídeo (N). O COVID-19 pode ser diagnosticado em laboratório usando RT-qPCR detectando genes SARS-CoV-2 em amostras clínicas coletadas de pacientes suspeitos. Para a detecção sensível de SARS-CoV-2, um ensaio padronizado e validado com desempenho de laboratório extremamente preciso é crucial.

Monkeypox

O Monkeypox humano (MPX) é uma doença zoonótica emergente causada pelo vírus Monkeypox (MPXV), um vírus de DNA de fita dupla que pertence ao gênero Orthopoxvirus dentro da família Poxviridae, subfamília, Cordopoxvirinae. Apesar de ter sido descoberta em macacos em cativeiro em 1958 e humanos da República Democrática do Congo (RDC) em 1970, um teste de diagnóstico de MPXV não é frequentemente usado em laboratórios de diagnóstico. Um método de PCR preciso e rápido em tempo real que pode ser usado para diagnosticar MPXV em humanos foi assim desenvolvido.

Malária

A malária ainda é uma questão importante em todo o mundo. De acordo com os Centros de Controle e Prevenção de Doenças, a malária deve ser considerada no diagnóstico diferencial de pacientes febris que viajaram para uma área onde é endêmica, bem como em todos os pacientes que sofrem febres de origem desconhecida, independentemente do histórico de viagens. Para muitos laboratórios, fornecer esses serviços de diagnóstico e manter a experiência pode ser difícil. O diagnóstico de PCR em tempo real da malária tem vantagens sobre os métodos microscópicos tradicionais, especialmente quando a parasitemia é baixa e ao lidar com infecções mistas. A diferenciação rápida e precisa do Plasmodium também é necessária para instituir terapia adequada, particularmente o P. falciparum, uma vez que são as espécies que causam aproximadamente 95% das mortes relacionadas à malária.

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