Perguntas e respostas sobre o sistema de PCR digital RainSure Droplet

1. Amostras de DNA:
OD260/280 = 1,6-1,8
Concentração ≥ 10 ng/μL
Volume ≥ 10 μL
Enviado no gelo (compressas de gelo)

2. Amostras de RNA:
OD260/280 = 1,8-2,0
Concentração ≥ 20 ng/μL
Volume ≥ 20 μL
Enviado no gelo (gelo seco)

3. Iniciadores ddPCR:
Concentração = 450 nM-900 nM

4. Sonda ddPCR:
Concentração = 250 nM

1. Execute o arquivo de instalação no modo administrador

2.Defina o inglês como idioma padrão

Concentração de amostra extremamente baixa.Para positivo limítrofe, é necessário realizar uma análise aprofundada em combinação com materiais de controle de qualidade negativo/positivo

A(s) cepa(s) alvo pode(m) ter sofrido mutação, baixa eficiência de extração de ácido nucleico.

Para uso de reagentes de terceiros, é necessário otimizar e verificar com o sistema RainSure dPCR.Alguns parâmetros incluem concentração de primers e sondas, compatibilidade enzimática com o óleo de geração de gotículas RainSure e perfil de ciclagem térmica.

Isso está amplamente relacionado ao erro experimental (manipulação).Recomenda-se colocar a pipeta verticalmente com a ponta contra o fundo do poço da amostra no cartucho ao adicionar o mastermix para evitar a criação de bolhas de ar no poço da amostra.Se aparecerem bolhas de ar no poço da amostra, bolhas grandes serão criadas ao gerar gotas, resultando em um número reduzido de gotas.

Além disso, lembre-se de sempre adicionar óleo primeiro e depois adicionar o mastermix para garantir a geração bem-sucedida de gotículas.No entanto, é sempre importante examinar a mercadoria no recebimento, bem como monitorar sua temperatura de armazenamento para descartar a qualidade comprometida devido à logística e armazenamento.

1. O chip é deixado por muito tempo (> 10 minutos) após a adição de óleo de geração de gotículas

2. Introdução de bolhas durante a adição da amostra
3. Precisão de pipetagem

4. Não adicionar óleo, mas mastermix primeiro