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PCR em tempo real

A reação em cadeia da polimerase em tempo real, às vezes conhecida como qPCR, é uma técnica de laboratório de biologia molecular baseada na reação em cadeia da polimerase (PCR).Em vez de detectar a amplificação no final da PCR como na PCR tradicional, ela monitora a amplificação de uma molécula de DNA alvo enquanto ela está acontecendo (ou seja, em tempo real).A PCR em tempo real pode ser empregada semi-quantitativamente (ou seja, acima/abaixo de uma quantidade específica de moléculas de DNA) (PCR semi-quantitativa em tempo real) e quantitativamente (PCR quantitativa em tempo real).
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PCR em tempo real e doenças infecciosas

Os distúrbios infecciosos podem ser transmitidos de uma pessoa para outra, direta ou indiretamente, porque são causados ​​por microrganismos patogênicos, como bactérias, vírus, parasitas ou fungos.Infelizmente, mesmo em laboratórios clínicos, o diagnóstico de distúrbios infecciosos está diretamente relacionado ao tempo necessário para identificar o patógeno pelos métodos tradicionais de cultura, que pode levar de horas a dias.Os benefícios da PCR em tempo real evoluíram nos últimos dez anos para se tornar o padrão da indústria para o diagnóstico de doenças infecciosas.Os especialistas em doenças infecciosas têm defendido a PCR em tempo real por causa de sua excepcional sensibilidade, especificidade, reprodutibilidade, ampla faixa dinâmica e velocidade de amplificação para identificar organismos que não podem ser cultivados in vitro ou em situações em que as técnicas de cultura existentes são insensíveis e/ou requerem tempo prolongado tempos de cultura.

COVID-19

A doença de coronavírus 2019, oficialmente denominada COVID-19 pela Organização Mundial da Saúde (OMS), é uma síndrome respiratória aguda grave (SARS) causada pelo novo coronavírus 2 da síndrome respiratória aguda grave (SARS-CoV-2).Os coronavírus são vírus de RNA envelopados, de sentido positivo e de fita simples, com pelo menos seis quadros de leitura abertos.O genoma do coronavírus codifica o pico de glicoproteínas estruturais (S), membrana (M), envelope (E) e nucleocapsídeo (N).O COVID-19 pode ser diagnosticado em laboratório usando RT-qPCR detectando genes SARS-CoV-2 em amostras clínicas coletadas de pacientes suspeitos.Para detecção sensível de SARS-CoV-2, um ensaio padronizado e validado com desempenho laboratorial extremamente preciso é crucial.

varicela

A varíola humana dos macacos (MPX) é uma zoonose emergente causada pelo vírus da varíola dos macacos (MPXV), um vírus de DNA de fita dupla que pertence ao gênero Orthopoxvirus dentro da família Poxviridae, subfamília Chordopoxvirinae.Apesar de ter sido descoberto em macacos cativos em 1958 e em humanos da República Democrática do Congo (RDC) em 1970, um teste de diagnóstico de MPXV não é usado com frequência em laboratórios de diagnóstico.Assim, foi desenvolvido um método de PCR preciso e rápido em tempo real que pode ser usado para diagnosticar o MPXV em humanos.

Malária

A malária ainda é um grande problema em todo o mundo.De acordo com os Centros de Controle e Prevenção de Doenças, a malária deve ser considerada no diagnóstico diferencial de pacientes febris que viajaram para uma área endêmica, bem como em todos os pacientes que apresentam febre de origem desconhecida, independentemente do histórico de viagens. .Para muitos laboratórios, pode ser difícil fornecer esses serviços de diagnóstico e manter a experiência.O diagnóstico da malária por PCR em tempo real tem vantagens sobre os métodos microscópicos tradicionais, especialmente quando a parasitemia é baixa e quando se trata de infecções mistas.A diferenciação rápida e precisa das espécies de Plasmodium também é necessária para instituir a terapia adequada, particularmente P. falciparum, uma vez que é a espécie que causa aproximadamente 95% das mortes relacionadas à malária.

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